
SRB检测方法即磺酰罗丹明B比色法,是一种基于染料结合特性定量检测细胞增殖的生物实验技术。该方法通过测定细胞蛋白含量变化反映增殖状态,属于体外细胞毒性及药物筛选的常用手段。
SRB为阴离子染料,在酸性条件下与细胞蛋白的碱性氨基酸特异性结合,其540nm波长吸光值与细胞数量呈线性正相关。相较于MTT法,SRB染色后稳定性更高,固定细胞可长期保存且检测时间灵活。实验流程包括细胞固定、SRB染色与Tris-base溶解三步骤,需注意染色后需快速冲洗以避免染料解吸附。其线性范围为吸光值1.5—2.0以下,超出需稀释复测,适用于高通量药物筛选。
该方法计算公式由美国国立癌症研究所提出,通过对比药物作用前后吸光值差异计算细胞增殖百分率(PG)。根据实验数据存在两种计算模型,分别对应细胞增殖与抑制状态下的定量分析。
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